B27無血清培養基不含有蛋白質,但可能含有植物或酵母的水解產物。很多B27無血清培養基都不含動物來源成分。
B27無血清培養基的基本配方:
基本成分為基礎培養基及添加組分兩大部分。用于生物制藥和疫苗生產的細胞在體外培養時,多數呈貼壁生長或兼性貼壁生長;而當其在B27無血清培養基中生長時,由于缺乏血清中的各種粘附貼壁因子如纖粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原、玻表粘連蛋白,細胞往往以懸浮形式生長。
B27無血清培養基的優點:
增加確定性。
性能更加一致。
容易進行純化和后期處理。
對細胞功能進行評估。
增強生長和/或產量。
生理反應性的更好對照。
加強細胞內介質的檢測。
B27無血清培養基使用方法
血清仍是動物細胞培養中基本的的添加物,尤其是在原代培養或者細胞生長狀況不良時,常常會先使用有血清的培養液進行培養,待細胞生長旺盛以后,再換成無血清培養液。
細胞轉入B27無血清培養基培養要有一個適應過程,一般要逐步降低血清濃度,從10%減少到5%,3%,1%,直至無血清培養。在降低過程中要注意觀察細胞形態是否發生變化,是否有部分細胞死亡,存活細胞是否還保持原有的功能和生物學特性等。
在實驗后這些細胞一般不再繼續保留,很少有細胞能夠長期培養于B27無血清培養基而不發生改變的。細胞轉入B27無血清培養基之前,要留有種子細胞,種子細胞按常規培養于含血清的培養基中,以保證細胞的特性不發生變化。